督脉上的主要穴位有28个，它们是长强穴、腰腧穴、腰阳关穴、命门穴、悬枢穴、脊中穴、中枢穴、筋缩穴、至阳穴、灵台穴、神道穴、身柱穴、陶道穴、大椎穴、哑门穴、风府穴、脑户穴、强问穴、后顶穴、百会穴、前项穴、卤会穴、上星穴、神庭穴、素髂穴、水沟穴、兑端穴、龈交穴。督脉上的28个穴位中，首穴为长强穴，末穴为龈交穴，其中14个穴位在头部．12个穴位在后背，2个穴位在臀部。

督脉起于长强穴，出于会阴部，来到体表在尾骨沿脊背上行，直到头部，从百会穴向下直到头项、额头，至口里的龈交穴：另有一支上行至前额，于巅顶交会，入络于脑，再出下项．沿肩胛骨内，脊柱两旁，到达腰中，进入脊柱两侧的肌肉，与肾脏相联络。

督脉主气，能鼓舞生命阳气，可按摩肩、背、腰部各个穴位疏通经脉。